Принсипҳо ва усулҳои таҳлили миқдорӣ бо хроматографияи моеъ

Механизми ҷудокунии хроматографияи моеъ ба фарқияти наздикии ҷузъҳои омехта барои ду фаза асос ёфтааст.

Аз рӯи фазаҳои гуногуни статсарӣ хроматографияи моеъ ба хроматографияи моеъ-сахт, хроматографияи моеъ-моеъ ва хроматографияи фазаи пайвастшуда тақсим мешавад.Аз ҳама васеъ истифодашаванда хроматографияи моеъи сахт бо гели кремний ҳамчун пуркунанда ва хроматографияи фазавии пайвастшуда бо микросилика ҳамчун матритса мебошанд.

Хроматографияи моеъро мувофиқи шакли фазаи статсионарӣ ба хроматографияи сутунӣ, хроматографияи коғазӣ ва хроматографияи қабати тунук тақсим кардан мумкин аст.Мувофиқи қобилияти адсорбсия, онро ба хроматографияи адсорбсия, хроматографияи тақсимкунӣ, хроматографияи мубодилаи ионҳо ва хроматографияи пермеатсияи гел тақсим кардан мумкин аст.

Дар солҳои охир, ба системаи хроматографияи сутуни моеъ системаи ҷараёни моеъи фишори баланд илова карда шуд, то фазаи мобилиро дар зери фишори баланд босуръат ҷараён диҳад, то таъсири ҷудошавиро беҳтар кунад, аз ин рӯ хроматографияи моеъи баландсифат (инчунин бо фишори баланд маълум аст) пайдо шудааст.

ҚИСМ
01 Принсипи тахлили микдори хроматографияи моеъ

Барои муайян кардани миқдор дар асоси сифатӣ, моддаҳои пок ҳамчун стандартҳо заруранд;

Миқдори хроматографияи моеъ як усули нисбатан миқдорӣ аст: яъне миқдори таҳлилшаванда дар омехта аз рӯи миқдори маълуми намунаи стандарти тоза ҳисоб карда мешавад.

ҚИСМ
02 Асос барои муайян кардани миқдор тавассути хроматографияи моеъ

Маблағи ҷузъи ченшуда (W) ба арзиши посух (A) мутаносиб аст (баландии қулла ё майдони қулла), W=f×A.

Омили ислоҳи миқдорӣ (f): Ин доимии мутаносибии формулаи ҳисобкунии миқдорӣ ва маънои физикии он ҳаҷми ҷузъи ченшуда мебошад, ки бо арзиши вокуниши воҳид (майдони қулла) ифода ёфтааст.

Омили ислоҳи миқдорӣ метавонад аз миқдори маълуми намунаи стандартӣ ва арзиши посухи он ба даст оварда шавад.

Қимати ҷавобии ҷузъи номаълумро чен кунед ва миқдори ҷузъро тавассути омили ислоҳи миқдорӣ ба даст овардан мумкин аст.

ҚИСМ
03 Истилоҳоти умумӣ дар таҳлили миқдорӣ

Намуна (намуна): маҳлуле, ки дорои моддаи таҳлилӣ барои таҳлили хроматографӣ мебошад.Ба намунаҳои стандартӣ ва номаълум тақсим карда мешавад.

Стандарт: Маҳсулоти тоза бо консентратсияи маълум.Намунаи номаълум (ношинос): омехтае, ки консентратсияи он бояд санҷида шавад.

Вазни намуна: Вазни аслии намунае, ки бояд санҷида шавад.

Маҳлул: Оффиенти ҳалкунандаи намунаи номаълум.

Компонент: қуллаи хроматографии аз ҷиҳати миқдорӣ таҳлилшаванда, яъне таҳлилшавандае, ки мундариҷаи он номаълум аст.

Миқдори компонент (миқдор): мундариҷаи (ё консентратсияи) моддаи санҷидашаванда.

Бутунӣ: Раванди ҳисоббарории ченкунии майдони қуллаи қуллаи хроматографӣ тавассути компютер.

Каҷи калибрченкунӣ: Каҷи хаттии таркиби ҷузъҳо нисбат ба арзиши ҷавоб, ки аз миқдори маълуми моддаи стандартӣ муқаррар карда мешавад, ки барои муайян кардани таркиби номаълуми моддаи таҳлилшаванда истифода мешавад.

ҚИСМ
04 Таҳлили миқдории хроматографияи моеъ

1. Усули хроматографии барои таҳлили миқдорӣ мувофиқро интихоб кунед:

l Қуллаи ҷузъи ошкоршударо тасдиқ кунед ва ба ҳалли (R) аз 1,5 зиёдтар ноил шавед

l Пайвастагии (тозагии) қуллаҳои хроматографии ҷузъҳои санҷидашударо муайян кунед

l Лимити ошкор ва лимити миќдори усулро муайян кунед;ҳассосият ва диапазони хатӣ

2. Бо намунаҳои стандартии консентратсияи гуногун хатти калибрченкунӣ таъсис диҳед

3. Санҷед, ки дурустӣ ва дақиқ будани усулҳои миқдорӣ

4. Барои татбиқи ҷамъоварии намуна, коркарди маълумот ва натиҷаҳои гузориш аз нармафзори мувофиқи идоракунии хроматография истифода баред

ҚИСМ
05 Муайян кардани қуллаҳои миқдорӣ (сифатӣ)

Ҳар як қуллаи хроматографиро ба таври сифатӣ муайян кунед, то миқдор муайян карда шавад

Аввалан, намунаи стандартиро барои муайян кардани вақти нигоҳдории (Rt) қуллаи хроматографӣ, ки бояд муайян карда шавад, истифода баред.Бо муқоисаи вақти нигоҳдорӣ, ҷузъи ба ҳар як қуллаи хроматографии намунаи номаълум мувофиқро пайдо кунед.Усули сифатии хроматографӣ муқоисаи вақти нигоҳдорӣ бо намунаи стандартӣ мебошад.Меъёр нокифоятасдиқи иловагӣ (сифатӣ)

1. Усули стандартии илова

2. Дар айни замон усулҳои дигарро истифода баред: усулҳои дигари хроматографӣ (тағйир додани механизм, масалан: бо истифода аз сутунҳои гуногуни хроматографӣ), детекторҳои дигар (PDA: муқоисаи спектр, ҷустуҷӯи китобхонаи спектр; MS: таҳлили оммавӣ, ҷустуҷӯи китобхонаи спектр)

3. Дигар воситаҳо ва усулҳо

ҚИСМ
06 Тасдиқи мутобиқати қуллаи миқдорӣ

Тасдиқи мувофиқати қуллаи хроматографӣ (тоза)

Боварӣ ҳосил кунед, ки дар зери ҳар як қуллаи хроматографӣ танҳо як ҷузъи ченшуда мавҷуд аст

Санҷед, ки дахолат аз моддаҳои якҷояшаванда (ифлосҳо)

Усулҳои тасдиқи мутобиқати қуллаи хроматографӣ (тозаӣ)

Муқоисаи спектрограммаҳо бо детекторҳои Photodiode Matrix (PDA).

Муайянкунии қуллаи покӣ

2996 Назарияи кунҷи покӣ

Усулҳои миқдорӣ, ки маъмулан дар ҚИСМИ 07 истифода мешаванд

Усули каҷи стандартӣ ба усули стандартии беруна ва усули стандартии дохилӣ тақсим мешавад:

1. Усули стандартии беруна: бештар дар хроматографияи моеъ истифода мешавад

Як қатор намунаҳои стандартии консентратсияи маълум бо истифода аз намунаҳои холиси пайвастагиҳо омода карда шуданд, ки ҳамчун намунаҳои стандартӣ санҷида шаванд.ба сутун то арзиши посухи он (майдони қулла) сӯзандору карда мешавад.
Дар доираи муайян, байни консентратсияи намунаи стандартӣ ва арзиши посух, яъне W= f×A муносибати хуби хатӣ мавҷуд аст ва каҷи стандартӣ сохта мешавад.

Дар ҳамон шароитҳои таҷрибавӣ, намунаи номаълумро ворид кунед, то арзиши посухи ҷузъи ченшавандаро ба даст оред.Мувофиқи коэффисиенти маълуми f, консентратсияи ҷузъи ченшавандаро гирифтан мумкин аст.

Афзалиятҳои усули стандартии беруна:амалиёт ва ҳисобкунии оддӣ, он як усули миқдорӣ маъмулан истифода мешавад;лозим нест, ки ҳар як ҷузъро ошкор ва элюта кунанд;намунаи стандартӣ талаб карда мешавад;шароити андозагирии намунаи стандартӣ ва намунаи номаълум бояд мувофиқ бошад;ҳаҷми сӯзандору бояд дақиқ бошад.

Камбудиҳои усули стандартии беруна:Шароити таҷрибавӣ бояд баланд бошад, ба монанди ҳассосияти детектор, суръати ҷараён ва таркиби фазаи сайёрро тағир додан мумкин нест;ҳаҷми ҳар як сӯзандору бояд такроршавандагии хуб дошта бошад.

2. Усули стандарти дохилӣ: дақиқ, вале мушкил, бештар дар усулҳои стандартӣ истифода бурда мешавад

Миқдори маълуми стандарти дохилӣ ба стандарт барои сохтани стандарти омехта илова карда мешавад ва як қатор стандартҳои кории консентратсияи маълум омода карда мешаванд.Таносуби молярии стандарт ба стандарти дохилӣ дар стандарти омехта бетағйир боқӣ мемонад.Ба сутуни хроматографӣ ворид кунед ва ҳамчун арзиши посух (маҳалли қуллаи намунаи стандартӣ/ майдони қуллаи намунаи стандартии дохилӣ) гиред.Мувофиқи муносибати хаттии байни арзиши ҷавоб ва консентратсияи стандарти корӣ, яъне W= f×A, каҷи стандартӣ сохта мешавад.

Миқдори маълуми стандарти дохилӣ ба намунаи номаълум илова карда мешавад ва ба сутун ворид карда мешавад, то арзиши посухи ҷузъи ченшавандаро ба даст орад.Мувофиқи коэффисиенти маълуми f, консентратсияи ҷузъи ченшавандаро гирифтан мумкин аст.

Хусусиятҳои усули стандарти дохилӣ:Ҳангоми амалиёт, намуна ва стандарти дохилӣ бо ҳам омехта ва ба сутуни хроматографӣ ворид карда мешаванд, то даме ки таносуби миқдори ҷузъи ченшуда ба стандарти дохилӣ дар маҳлули омехта доимӣ бошад, тағирёбии ҳаҷми намуна ба натичахои микдорй таъсир намерасонад..Усули стандарти дохилӣ таъсири ҳаҷми намуна ва ҳатто марҳилаи мобилӣ ва детекторро ҷуброн мекунад, аз ин рӯ он нисбат ба усули стандартии беруна дақиқтар аст.

ҚИСМ
08 Омилҳое, ки ба натиҷаҳои таҳлили миқдорӣ таъсир мерасонанд

Дақиқии паст метавонад боиси:

Интегратсияи нодурусти минтақаи қулла, таҷзия ё ифлосиҳое, ки ҳангоми тайёр кардани намуна ворид карда шудаанд, шишаи намуна мӯҳр нагирифтаанд, нӯшокӣ шудани намуна ё ҳалкунанда, тайёркунии нодурусти намуна, мушкилоти тазриқи намуна, омодасозии нодурусти стандарти дохилӣ

Сабабҳои эҳтимолии дақиқии паст:

Интегратсияи нодурусти авҷ, мушкилоти сӯзандору ё инжектор, таҷзияи намуна ё ифлосиҳое, ки ҳангоми тайёр кардани намуна ворид шудаанд, мушкилоти хроматографӣ, вокуниши таназзули детектор